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Bibliographic Metadata

  • Title
    Isolierung und Charakterisierung des Paramylon-Synthase-Komplexes aus unterschiedlichen Euglenida und Transkriptomanalyse : / vorgelegt von Onur Baltaci
  • Author
    Baltaci, Onur
  • Participants
    Preisfeld, Angelika
  • Corporate name
    Bergische Universität Wuppertal
  • Published
    Wuppertal, Juli 2023
  • Description
    1 Online-Ressource (X, 236 Seiten) : Illustrationen
  • Institutional Note
    Bergische Universität Wuppertal, Dissertation, 2023
  • Annotation
    Tag der Verteidigung: 10.10.2023
  • Defended on
    2023-10-10
  • Language
    German
  • Document type
    Dissertation (PhD)
  • URN
    urn:nbn:de:hbz:468-2-1322 
  • DOI
    10.25926/BUW/0-132 
Restriction-Information
  •  The document is publicly available on the WWW
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Abstract
  • Paramylon ist ein wasserunlösliches und unverzweigtes ß-1,3-Glucan, das als Reservekohlenhydrat bei den meisten Euglenida gebildet wird. Der Paramylon-Synthase-Komplex ist ein enzymatisch aktives Protein, das in der Membran der Paramylon-Granula lokalisiert und für die Synthese des Paramylons verantwortlich ist. In der vorliegenden Arbeit wurde der Paramylon-Synthase-Komplex aus Distigma proteus und Peranema sp. durch Saccharose-Dichtegradienten- Zentrifugation isoliert und mittels Native-PAGE, SDS-PAGE und des UDP-GloTM-Glucosyltransferase-Tests charakterisiert. Der Paramylon-Synthase-Komplex der beiden Spezies ist demnach unter nativen Bedingungen ein 669 kDa großer Proteinkomplex. Bei Distigma proteus wurden mittels SDS-PAGE drei Untereinheiten im Bereich 60 kDa und zwischen 34 und 43 kDa identifiziert. Bei Peranema sp. konnte nur eine einzige Untereinheit im Bereich zwischen 50 und 70 kDa detektiert werden. Anhand von enzymatischen und chemischen Analysen wurde bestätigt, dass bei den untersuchten Spezies das Enzymprodukt Paramylon ausschließlich aus Glucose-Molekülen aufgebaut ist. Im Weiteren wurde die Transkriptomanalyse zur Feststellung der differentiellen Genexpression bei Euglena gracilis und Distigma proteus in der Licht- und Dunkelphase durchgeführt. In dieser Analyse wurden keine Veränderungen der Transkriptionslevels zwischen den beiden Wachstumsbedingungen beobachtet. Im Gegensatz zu der Transkriptomanalyse zeigten die anschließenden qPCR-Analysen, dass die Gene für den Paramylon-Synthase-Komplex (GSL 1 und GSL 2) bei Euglena gracilis unter verschiedenen Wachstumsbedingungen herunter- oder heraufreguliert werden.
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